液相色谱分析，出现"烦人"的溶剂效应，如何高效解决？

       溶剂效应（solvent effect）亦称“溶剂化作用”，指液相分析中，溶剂的物理和化学性质影响反应平衡和反应速度的效应，可能造成色谱峰展宽、分叉、保留时间漂移、峰面积变化，双峰等现象。与此同时，较早洗脱的峰出现前延或分叉。

      产生溶剂溶剂效应后，我们常见的解决办法是用流动相溶解样品或减小进样量。可是，用流动相溶解样品真的是解决溶剂效应的好办法吗？下面分别以制药和食品检测领域的两位客户的真实案例来阐述。

案例一：知名药企碰到的液相色谱困境

       某知名制药企业生产的塞来昔布，是目前全球处方量最大的非甾体类抗炎镇痛药（NSAIDs）。企业参考美国药典论坛方法，建立了塞来昔布杂质D的HPLC-UV测定法，对塞来昔布胶囊中可能存在的杂质D进行检测，可以更好的控制塞来昔布及其制剂的产品质量。

实验结果：

参考美国药典色谱条件，在液相色谱仪上进样杂质D对照品溶液，结果显示杂质D峰出现峰前延。

       考虑到样品配制用溶剂和流动相不一致，存在样品溶液与流动相的兼容性问题，可能引起溶剂效应。为证明溶剂效应的存在，改用流动相稀释杂质D对照品溶液，在相同仪器上重新进样，结果显示杂质D峰形正常。

用流动相溶解样品，带来的困扰

溶剂效应消除器，小配件大作用

使用溶剂效应消除器后，没想到，几千元的小配件（可以使用3-5年，每天不到1元钱），解决了药企的大麻烦，完全不用改变色谱条件，而且解决了溶剂效应问题。

将溶剂效应消除器接于液相色谱进样器与色谱柱之间，参考美国药典论坛色谱条件进样杂质D对照品溶液。结果显示杂质D峰形正常。

注：图谱来源于广州汇元医药科技有限公司官网

注：以上仅是众多药物分析中一个案例。我们翻看2020版中国药典，不少品种（比如：2020版二部P630 妥布霉素），为避免分析中出现溶剂效应，不得已采取了流动相或纯水溶解，有了溶剂效应消除器后，就可以使用保存期更长或溶解性更好的甲醇或乙腈来溶解，就可以避免上述药企出现的困境。

案例二：氮吹溶剂置换，带来的困扰

GB 31656.8-2021水产品中有机磷农药的测定，按照国标的操作，检测工作者遇到了以下困扰：

氮吹溶剂置换，带来的困扰

困扰1：国标的前处理过程非常繁琐，样品提取后，45℃氮吹，由于有机磷农药易挥发，温度不能太高，氮吹时间差不多2-3小时。如此漫长的氮吹，实在无法忍受。（注：样品中有机磷农药的含量比较高，之所以需要氮吹，主要目的是为了溶剂置换，避免分析过程中的溶剂效应）

困扰2：氮吹不能全吹干，否则有机磷农药的回收率受到较大影响。可是，吹至近干，一方面时间非常不好控制，快到最后一些时，需密切关注氮吹过程。另一方面，即使吹至是近干，还是一部分有机磷农药的回收率会受到一些影响。

溶剂效应消除器，省去了漫长的氮吹

加装溶剂效应消除器后，大大的简化了前处理步骤，无需溶剂置换，可省去氮吹过程（2-3小时），过滤膜后直接进样。而且，部分有机磷农药的回收率较大提高了。

省去氮吹，过滤膜后直接进样的对比图

注：以上图谱来源于某国家检测单位

注：如果在分析中用流动相溶解样品不好，只能使用纯甲醇或纯乙腈来溶解样品，此时更应使用溶剂效应消除器，解决分析中溶剂效应的问题。

比如：最近比较热的全氟化合物的分析，用流动相溶解样品后，发现长链化合物基本没有响应，经过反复试验，才发现长链PFAS用流动相溶解不好，改为纯甲醇后，能实现完全溶解。可是，上机分析时，又出现明显的溶剂效应问题。此时，加装溶剂效应消除器后可较好解决这个问题。